Cytologická diagnostika je neoddeliteľnou a nezanedbateľnou súčasťou patológie už od roku 1920 a jej význam prebieha aj v súčasných laboratóriách. Základnou morfologickou a funkčnou jednotkou živého organizmu je bunka, pričom cytologická diagnostika sa zameriava na štúdium jej morfologických zmien. Cytologický obraz je dotváraný pozadím, vzťahmi medzi bunkami, ich usporiadaním a celkovým kontextom. Na základe týchto ukazovateľov je možné stanoviť diagnostický záver a priradiť morfologické charakteristiky k príslušným ochoreniam. V súčasnosti sa na spresnenie diagnostiky využívajú aj imunocytochemické metódy.
Kvalita laboratórneho vyšetrenia je priamo závislá od kvality odberu materiálu. Po správnom odobratí, fixovaní a transporte do laboratórií sa materiál ďalej spracúva prepracovanými štandardizovanými technickými postupmi, čím sa pripravuje na hodnotenie odborným personálom a patológmi.
Vyšetrenia sa delia do dvoch hlavných skupín:
- Cervikálna cytológia
- "Iná" cytológia
Cervikálna cytológia
Cervikálna cytológia zohráva kľúčovú úlohu v skríningu rakoviny krčka maternice. V rámci tohto vyšetrenia disponujeme prepracovaným systémom skríningu a reskríningu, pri ktorom minimálne 10 % cytologických odberov podlieha opätovnému hodnoteniu. V súčasnosti sa v našich laboratóriách vyhodnocuje najväčší počet cytológií na Slovensku, približne 250-tisíc pacientiek ročne. Vďaka prepracovanému systému reskríningu, pravidelnej účasti v externej kontrole kvality (Labquality Fínsko) a kontinuálnemu vzdelávaniu diagnostikov zabezpečujeme vysokú kvalitu hodnotenia vzoriek a spĺňame odporúčania a normy Európskej únie.
Konvenčná cytológia
Až do 90-tych rokov minulého storočia sa v praxi využívala tzv. konvenčná cytológia. Ide o spoľahlivú, pre pacientku šetriacu, neinvazívnu a ekonomicky nenáročnú skríningovú diagnostickú metódu. Jej senzitivita je okolo 72 % a umožňuje zachytiť predrakovinové (dysplastické) lézie krčka maternice včasných štádiách, čo následne vedie k ich liečbe. Týmto spôsobom sa výrazne znižuje úmrtnosť na rakovinu krčka maternice, ako aj sociálne a ekonomické dopady tohto ochorenia.
Zavedenie tejto metodiky sa spája s Dr. Gergiosom Papanikolaou, podľa ktorého nesie aj skrátený názov PAP test. Do praxe bola zavedená v 40-tych rokoch 20. storočia a vykonáva sa dodnes. Tento typ diagnostiky prešiel vývojom, a to nielen v oblasti klasifikácie zachytených lézií (celosvetovo sa používa Bethesda systém, ktorý využívame aj v našom laboratóriu), ale aj v zavádzaní modernej prístrojovej techniky na hodnotenie cytologických preparátov/sterov.
V našich laboratóriách sa všetky konvenčné cytologické preparáty skenujú na zariadeniach Focal Point, ktoré sú prepojené s automatickými mikroskopmi. Skríneri následne hodnotia počítačom určené skupiny abnormálnych buniek, čím je zabezpečená kvalita a rýchlosť diagnostiky.
Nevýhody konvenčnej cytológie
Nevýhodou konvenčnej cervikálnej cytológie je výskyt nereprezentatívnych preparátov, ktoré môžu byť spôsobené kontamináciou krvou, zápalovými elementami, hlienom alebo zlou kvalitou preparátov v dôsledku nesprávneho odberu a fixácie. S objavom súvislosti medzi vznikom rakoviny krčka maternice a infekciou vysokorizikovými typmi HPV infekcie sa objavila potreba detekovať nielen dysplastické dlaždicové alebo žľazové bunky, ale aj prítomnosť týchto vírusov.
Liquid-Based Cytology (LBC)
V reakcii na uvedené potreby vznikla v 90-tych rokoch minulého storočia v USA nová diagnostická metóda, ktorá umožnila spojiť a rozšíriť možnosti cytologického vyšetrenia krčka maternice. Táto metóda je známa ako Liquid-Based Cytology (LBC), alebo tiež tenkovrstvová cytológia.
Liquid Based Cytology (LBC) predstavuje novú technológiu, pri ktorej sa bunky odobraté z krčka maternice pomocou plastickej špachtle a endocervikálneho brushu, prípadne cervex brushou, ihneď vytrepú do tekutého fixačného a transportného média v špeciálnej nádobke (vialke). Tým sa zabezpečí ich fixácia a zabráni sa mechanickému poškodeniu. Takto uložené bunky je možné uchovávať pri izbovej teplote po dobu 5 až 6 týždňov. Z jedného odberu je možné pripraviť viacero cytologických preparátov (napr. pre imunocytochémiu, alebo úpravu nežiaducich prímesí - napr. krvi) a následne ich použiť pre genetické alebo mikrobiologické vyšetrenie.
Naše cytologické laboratóriá využívajú vo svete najviac zaužívanú a osvedčenú metódu ThinPrep firmy Hologic. Táto metóda pomocou podtlaku a rotácie randomizovane zabezpečuje koncentráciu epiteliálnych buniek oddelených od krvi, hlienu, zápalových buniek a iných nežiaducich prímesí, ktoré sťažujú mikroskopické hodnotenie. Bunky sú následne uložené v tenkej vrstve na sklíčko na okrúhlom poli s priemerom 20 mm. Celý proces separácie buniek, ich transport cez polykarbonátovú filtračnú membránu a umiestnenie na sklíčko preparátu automaticky riadi procesor.
Výsledkom je preparát, ktorý sa vo farbiacom automate farbí rovnako ako konvenčný cytologický náter podľa Papanicolaoua. Alternatívne sa môže použiť na imunocytochemickú detekciu onkoproteínov, resp. prognostických biomarkerov (p16, Ki67). Metódou LBC môžeme jedným vyšetrením analyzovať približne 50 000 až 75 000 buniek.
Hodnotenie, rovnako ako pri konvenčnej cytológii, sa realizuje štandardizovanými procesmi skríningu (počítačom riadený skríning TjinPrep imager, skríneri, patológ). Hodnotenie sa vykonáva podľa najnovšej verzie Bethesda systému, ktorý rozlišuje normálne bunky, bunky s benígnymi zmenami, bunky s neurčitou atypiou (ASCUS), ľahkú dyspláziu (LSIL), ťažkú dyspláziu (HSIL) a bunky karcinómové (skvamocelulárny karcinóm, adenokarcinóm a iné).
Výhody LBC oproti konvenčnému steru
- 2 - 4 násobne zvyšuje záchyt premalígnych dlaždicovobunkových ale aj glandulárnych lézií, v závislosti od stupňa dysplázie, a to bez zníženia špecificity záchytu.
- Umožňuje dodatočné imunocytochemické vyšetrenia tej istej vzorky buniek, zamerané na prognostické faktory prípadnej „high risk“ HPV infekcie, ako sú p16, Ki67 a HPV-L1, čo spresňuje prognózu vývoja ochorenia.
- Z materiálu tej istej vialky (vzorky) možno vyšetriť HPV a STD.
- Významne znižuje počet nečitateľných alebo suboptimálne čitateľných sterov a zvyšuje počet reprezentatívnych sterov vo vzťahu k endocervikálnym bunkám.
- Umožňuje tzv. počítačom riadený skríning, ktorý urýchľuje a skvalitňuje diagnostický proces a eliminuje chyby vzniknuté ľudským faktorom (únava, nepozornosť a pod.).
Táto metóda v súčasnosti predstavuje zlatý štandard v cytologickom skríningu krčka maternice vo vyspelých štátoch západného sveta. LBC sme zaviedli do bežnej praxe ako prví na Slovensku už v roku 2010 v cytologických laboratóriách spoločnosti Medicyt, a.s.
Často kladené otázky – Ako odobrať vzorku pomocou novej cytológie na báze tekutín
Cytológia moču
Cytológia moču je diagnostický test, ktorý zahŕňa vyšetrenie vzoriek moču na zistenie abnormálnych buniek, ktoré môžu naznačovať rôzne stavy močových ciest vrátane infekcií a rakoviny. Cieľom tohto testu je odhaliť akékoľvek abnormálne bunky, vrátane rakovinových alebo predrakovinových buniek, ktoré môžu naznačovať ochorenia ako rakovina močového mechúra, rakovina obličiek alebo infekcie močových ciest.
Pri tomto vyšetrení sa odoberie vzorka moču, bunky sa umiestnia na mikroskopické sklíčko a zafarbia sa pre lepšiu viditeľnosť. Vyškolený patológ alebo laborant vyšetrí sklíčko pod mikroskopom, hľadajúc príznaky rakoviny, infekcií alebo iných abnormálnych bunkových zmien. Cytológia moču sa primárne používa na detekciu rakoviny močového mechúra, ale môže byť užitočná aj pri identifikácii iných ochorení močových ciest.
Príprava na test a výsledky
Príprava na test je pomerne jednoduchá, ale dôležitá pre presné výsledky. Zvyčajne sa odporúča odobrať stredný prúd ranného moču za čo najviac sterilných podmienok do sterilných skúmaviek. Pred močením je dôležité dôkladne opláchnuť pohlavné orgány teplou vodou. Pri ženách sa odporúča umyť sliznice smerom spredu dozadu mydlovou vodou.
Po spracovaní vzorky a rozložení buniek na mikroskopické sklíčko sa výsledok hodnotí ako:
- Negatívne pre abnormality: Nenájdu sa žiadne abnormálne alebo rakovinové bunky.
- Pozitívne na abnormálne bunky: Prítomnosť abnormálnych buniek môže naznačovať rakovinu alebo iné stavy.
Pre cytológiu moču neexistuje striktný „normálny rozsah“; normálny výsledok by neukázal žiadne abnormálne alebo rakovinové bunky. Cytológia moču je obzvlášť účinná na zistenie rakoviny močového mechúra, najmä v neskorších štádiách. Pozitívny výsledok znamená nález abnormálnych buniek v moči, zatiaľ čo negatívny výsledok zvyčajne naznačuje neprítomnosť rakoviny alebo infekcií.
Zvyčajne trvá niekoľko dní, kým laboratórium spracuje vzorku moču a vygeneruje výsledky. S cytológiou moču sú spojené minimálne riziká. Ide o cenný nástroj na zisťovanie abnormalít v močovom trakte, najmä rakoviny močového mechúra, a často sa používa spolu s inými diagnostickými metódami na potvrdenie diagnóz.
Prevencia rakoviny krčka maternice a úloha cytológie
Rakovina krčka maternice patrí medzi najčastejšie zhubné ochorenia u žien, pričom najčastejšie sa vyskytujú tzv. skvamózne karcinómy, za ktorými stojí HPV vírus. Dobrou správou však je, že toto ochorenie je možné zachytiť v skorom štádiu, takže sa nemusí vôbec rozvinúť.
Cytológia krčka maternice je základnou metódou v prevencii tohto ochorenia. Počas gynekologického vyšetrenia sa z krčka maternice odoberú bunky, ktoré sa následne posielajú na cytologické vyšetrenie. Slovo „cytológia“ pochádza z gréckeho „cytos“, čo znamená bunka. Takéto vyšetrenie prebieha v laboratóriách patológie, kde ich prezerajú tzv. „skrínerky“.
Hodnotenie cytologického nálezu
V cytologickom náleze sa hodnotia bunky z vonkajšej strany krčka maternice (tzv. dlaždicové) a z vnútornej strany (tzv. žľazové bunky). Okrem toho sa posudzuje množstvo zápalových buniek či kolónie baktérií.
Atypické bunky neznámeho významu (ASC-US) nepôsobia ideálne, ale ešte nemajú charakter predrakovinových zmien. Môžu byť spôsobené napríklad zápalom. Atypické skvamózne bunky (ASC-H) označujú prípady, kde nemôžeme jednoznačne vylúčiť predrakovinové a rakovinové štádiá. Atypické žľazové bunky (AGC) sú vysoko suspektné z neoplastickej proliferácie.
Diagnóza LSIL predstavuje bunkové zmeny nízkeho stupňa. Diagnóza HSIL predstavuje bunkové zmeny vysokého stupňa, stále však nemusí ísť o invazívne štádium rakoviny.
Pravidelné vyšetrenia sú kľúčové v prevencii rakoviny krčka maternice. Hoci nejde o najpríjemnejší zákrok, je určite lepšie ho absolvovať, než čeliť liečbe rozvinutého ochorenia.